Es buah merupakan satu produk minuman tanpa kemasan. Minuman es buah banyak diminati oleh masyarakat. Disamping itu es buah berpotensi sebagai sumber penularan penyakit apabila dalam proses penyajiannya terkontaminasi oleh mikroorganisme. Penelitian ini bertujuan untuk Untuk mengetahui faktor-faktor yang berhubungan dengan kebaradaan Escherichia coli pada es buah yang dijual di sekitar pusat Kota Temanggung.. Jenis penelitian ini adalah Explanatory Research dan metode yang digunakan adalah observasional dengan pendekatan Cross sectional. Jumlah sampel yang diambil 30, tehnik pengumpulan data dengan pemeriksaan laboratorium dan observasi. Untuk mengetahui faktor €“ faktor yang berhubungan dengan keberadaan bakteri Escherichia coli pada es buah dilakukan analisis univariat dengan distribusi frekuensi, analisis bivariat dengan uji chi square. Hasil penelitian didapatkan bahwa terdapat hubungan antara kondisi higiene penjamah dengan keberadaan bakteri E. coli pada es buah (p=0,024), tidak ada hubungan antara kondisi sanitasi alat dengan keberadaan E. coli pada es buah (p=0,431) , tidak terdapat hubungan antara kondisi sanitasi air dengan keberadaan E. coli pada es buah (p=0,068), tidak terdapat hubungan antara kondisi sanitasi tempat dengan keberadaan E. coli pada es buah (p=0,936), dan tidak terdapat hubungan antara kepadatan lalat dengan keberadaan E. coli pada es buah (p=0,246). Kontaminasi es buah lebih disebabkan oleh higiene penjamah yang masih kurang. Oleh karena itu, Dinas kesehatan hendaknya memberikan pembinaan, pengawasan dan penyuluhan kepada penjual es buah tentang cara-cara pengolahan es buah yang higienis.